海文专业课08年西医综合之生化强化班讲义(十一)
第十章 DNA 的生物合成【重要内容】
1、半保留复制的证明;
2、复制过程的特点及相关酶的作用;
3、DNA 损伤的类型及原因;
4、反转录的特点(概念/反转录酶)
DNA 的生物合成
DNA 生物合成：DNA 复制、修复合成、逆转录
第一节 DNA 复制
一、复制体系：原料(4 种 dNTP)、模板(母链 DNA)、引物、酶及蛋白因子，等
1、DNA 聚合酶(DNA 依赖的 DNA 聚合酶，DDDP)
作用原核生物 DNA 聚合酶
5’端→3’端聚合酶活性催化生成磷酸二酯键有有
5’端→3’端外切酶活性切除引物、突变片段有无
3’端→5’端外切酶活性校对有有
功能复制中的去除
引物并填补空
隙、修复
原核生物 DNA 复制的中起主要作用的聚合酶是 DNA 聚合酶Ⅲ
原核生物修复合成中其主要作用的聚合酶是 DNA 聚合酶Ⅰ
二、特点：半保留复制、半不连续复制
1、半保留复制：以 DNA 为模板合成 DNA，子代 DNA 中的一条链来自亲代
151415n【经典实验】 N 标记- N 追踪，没有标记 N 的 DNA 分子数目=2 -2
三、基本过程
1、螺旋松弛与解链：拓扑异构酶、解链酶(解螺旋酶)、单链结合蛋白(SSB)
多数为定点双向复制
原核生物一般只有 1 个复制原点，属于单复制子复制;真核生物具有多个复制原点，属于多
复制子复制
2、引发(RNA 引物合成)：引物酶(DnaG)及引发体(其它的 Dna 蛋白)
原核生物复制时的 RNA 引物较长，真核生物的引物较短
3、链延长：DNA 聚合酶Ⅲ(原核)
半不连续复制：先导链(领头链)连续合成、随从链分段合成
冈崎片段：随从链中的 DNA 片段。原核生物的冈崎片段较长，真核生物的冈崎片段较短
新合成链的延长方向：5’端→3’端
碱基配对：双链反平行，A-T,T-A,G-C,C-G
原核生物的链延长速度大于真核生物
4、终止：DNA 聚合酶Ⅰ(原核)、连接酶
5、末端复制(真核)：端粒酶
端粒酶：由 RNA 和蛋白质组成，RNA 作为模板，蛋白组分催化末端 DNA 合成，故端粒酶实质
上属于一种特殊的反转录酶。
第二节 DNA 损伤与修复
一、DNA 损伤与突变：
1、常见导致 DNA 损伤的环境因素
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